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  • 特殊生物的超低温保存法
  • 点击次数:1202 发布时间:【2019-08-29】
  •  1.大多数微生物可用超低温保存,超低温保存法是适用范围广的微生物保存法:

     通常可用超低温的方法保存(ATCC 1983;Halliday,Baker 1985)。此法是将冻存在小管或安瓿里的细胞以较慢的冷冻速率(1℃/分钟)冷冻,直至—150℃,再将这些小管贮存在—150~-196℃的液氮中。

       超低温保藏的微生物必须始终贮存在温度非常低的环境中,因此需要液氮罐

    在长期贮存的过程中必须经常注意补充液氮。这种贮存方式比冻干法需要更多的经费,包括为了维持贮存温度所必要的劳动力和液氮等。
    2 材料
      病毒超低温保存所需材料有:热收缩塑料管(Nunc Cryoflex),液氮罐,防护手套和面罩,久性记号笔,气体喷灯,装液氮的保温瓶。
    3 方法
      (1)剪一段两端各超出冷冻管长度2cm 的热收缩塑料管。
      (2)将含有澄清病毒悬液(组织培养的上清培养基,或组织培养基内的细胞溶解产物均可)冰浴几分钟,用灭菌移液管将0.2ml 冰浴过的上清悬液分装到冷冻管内,并将盖子拧紧。
      (3)将有病毒的冷冻管放入热收缩塑料管中部,插入正确的标签。
      (4)用喷灯小心加热热收缩塑料管,并使之包住冷冻管。注意不要用太高的温度加热热收缩塑料管。

      (5)再小心加热热收缩塑料管的两端,用大号镊子夹紧管的端口至*密封。
      (6)将密封好的冷冻管快速在装有液氮的保温瓶中冷冻(操作时要求戴面罩和手套)。
      (7)将冷冻过的冷冻管放入液氮罐中的格子内,同时记录样品的详细的存放位置、实验编号和存放日期等。
      (8)需要用时,迅速从液氮罐内取出所需样品,并投入37℃水浴箱中解冻后,用解剖刀片在冷冻管的硅化垫圈处切开热收缩塑料管。拧开冷冻管的盖子时不需要除去热收缩塑料管。

主营产品: 药品保存箱,4度血液保存箱,2-8度药品冷藏箱,-86度超低温冰箱,-40度冰箱
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